你遇到過ELISA試驗(yàn)中酶標(biāo)板失效的情況嗎
點(diǎn)擊次數(shù)：727 更新時(shí)間：2018-12-21
在進(jìn)行ELISA試驗(yàn)時(shí)，如果遇到酶標(biāo)板失效的情況，就會(huì)影響到后期的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，那么在哪些情況下酶標(biāo)板會(huì)失效呢，接下來小編為大家介紹一下。
1、通常商品化的酶標(biāo)板要求密閉4℃保存，長(zhǎng)時(shí)間暴露或未密閉保存，就會(huì)導(dǎo)致酶標(biāo)板失效，或者影響到終的測(cè)試結(jié)果。
2、第三板是否*按照前兩板加所有試劑，如果缺失其中某一步驟，結(jié)果也會(huì)無色。
一般來說，ELISA試劑盒的保質(zhì)期都在一年上下，如何保存得當(dāng)，就不會(huì)出現(xiàn)問題，但注意在使用中盡量不要反復(fù)凍融，試劑盒保存適當(dāng)?shù)沫h(huán)境溫度是4℃左右，同時(shí)建議大家ELISA試劑盒解凍后一次用完，已開封或者使用后，剩余試劑仍需按照試劑瓶標(biāo)簽所示的溫度保存，ELISA檢測(cè)試劑盒開封后的酶標(biāo)板要加干燥劑后密封保存于-20℃，避免潮濕。另外，如果將ELISA試劑盒剛從冰箱里面拿出來就立即使用的話，可能會(huì)影響，其直接的后果是對(duì)一些弱陽性標(biāo)本的檢測(cè)出現(xiàn)假陰性。
由此，小編建議大家：先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20分鐘以上后，再進(jìn)行測(cè)定，以使試劑盒在ELISA檢測(cè)試劑盒使用前與室溫平衡。這樣做的目的，主要是為了在后面的溫育反應(yīng)步驟中，能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度能較快地達(dá)到所要求的高度，以滿足測(cè)定要求。
接下來小編再為大家介紹在進(jìn)行ELISA試驗(yàn)時(shí)，我們都應(yīng)注意哪些事項(xiàng)：
1、從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2、各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
3、濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
4、請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔，如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高，請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定計(jì)算時(shí)請(qǐng)后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
5、 嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
